Teatud antigeenide (nt CD4 ja CD8) puhul on vesinikperoksiidi blokeerimisel epitoopidele kahjulik mõju, vähendades seega antikehade värvumise intensiivsust. Seetõttu on soovitatav blokeerimine pärast primaarse või sekundaarse antikeha inkubeerimist.
Miks on endogeense ensüümi blokeerimine IHC puhul oluline?
Sendogeensete ensüümide blokeerimine
Kui ensüüm on uuritavas koes loomulikult olemas, tuleb selle aktiivsus enne tuvastamisetappi blokeerida Kui kasutate tuvastamiseks HRP-d, endogeense peroksidaasi aktiivsuse tõttu võib tekkida mittespetsiifiline või kõrge taustavärvimine. … AP aktiivsus on suurem külmunud koes.
Kas blokeerimine on IHC jaoks vajalik?
Mis blokeerib immunohistokeemias? Blokeerimine on oluline, et vältida antikehade või muude reaktiivide mittespetsiifilist seondumist koega. … Mittespetsiifilise seondumise leevendamiseks tuleks enne primaarse antikehaga inkubeerimist läbi viia blokeerimisetapp.
Kuidas kustutada endogeense peroksidaasi aktiivsus?
Tüüpilised meetodid endogeense peroksidaasi aktiivsuse kustutamiseks koelõikudes on järgmised: Valmistage peroksidaasi blokeeriv lahus, lisades üheksale osale metanoolile üks osa 30% vesinikperoksiidi. Kastke slaidid sellesse lahusesse 10 minutiks.
Kuidas endogeenset biotiini peatada?
Dr. Rodney Miller on kasutanud ka munavalgetavidiini allikana ja lõssi allikana biotiini allikana, et eduk alt blokeerida endogeenset biotiini, kuid etappide vaheliste sektsioonide loputamiseks tuleks kasutada vett, kuna PBS sadestub. munavalgest valgud välja.
Endogeense peroksidaasi blokeerimine koes vesinikperoksiidiga
Endogenous peroxidase blocking in tissue with hydrogen peroxide
